Липиды рогового слоя относительно сложны, и их химические и физические свойства на молекулярном уровне мало изучены. Большие однослойные везикулы (LUV) с составом липидов, подобным составам рогового слоя, были приготовлены при pH 9 с коммерчески доступными липидами.
Эта система была использована в качестве модельной системы для молекулярных исследований липидов рогового слоя. LUV были выбраны в качестве модельной системы, поскольку они сравнительно более стабильны и могут быть более количественно охарактеризованы с точки зрения концентрации липидов, площади поверхности и объема, чем модельные системы, такие как суспензии смесей липидов, липидные пленки и небольшие однослойные везикулы.
Эта система была использована в качестве модельной системы для молекулярных исследований липидов рогового слоя. LUV были выбраны в качестве модельной системы, поскольку они сравнительно более стабильны и могут быть более количественно охарактеризованы с точки зрения концентрации липидов, площади поверхности и объема, чем модельные системы, такие как суспензии смесей липидов, липидные пленки и небольшие однослойные везикулы.
Результаты исследований наших LUV методом замораживания и криоэлектронной микроскопии показали наличие сферических пузырьков. Измерения квазиупругого светорассеяния выявили узкое распределение по размерам, с центром около 119 нм. При комнатной температуре LUV были стабильны в течение нескольких недель при pH 9 и в течение более 15 часов, но менее 24 часов при pH 6.
Измерения дифференциальной сканирующей калориметрии показали широкие эндотермические переходы с центром около 60−65 градусов C, что близко соответствует температуре перехода, сообщается для липидных экстрактов рогового слоя. Спиновые зонды, 5-доксилстеариновая кислота и 12-доксилстеариновая кислота, использовались для изучения молекулярной динамики липидов с помощью электронного парамагнитного резонанса (ЭПР).
Результаты ЭПР показали более ограниченное движение вблизи полярной области головной группы, чем вблизи центра области алкильной цепи. Профили движения спиновых меток вблизи полярной головной группы и в области алкильной цепи в LUV были получены в зависимости от температуры в диапазоне от 25 до 90 градусов C.
Мы также обнаружили, что распределение между липидной и водной фазами для каждого спинового зонда зависело от температуры и обычно коррелировало с фазовыми переходами, наблюдаемыми с помощью дифференциальной сканирующей калориметрии, и с подвижностью алкильных цепей, наблюдаемой с помощью ЭПР.
Таким образом, эта система LUV хорошо подходит для дополнительных молекулярных исследований в различных экспериментальных условиях.
Источник: cell.com
